Правила и требования к работе в стерильной лаборатории
2026-04-15
Мы уже рассказывали вам о чистых помещениях, а сегодня поговорим о похожих на них стерильных помещениях. На что следует обращать внимание при проведении экспериментов в стерильной лаборатории? Какие условия необходимо соблюдать?
Ⅰ.Классы стерильных помещений:
В зависимости от степени чистоты воздуха стерильные помещения обычно подразделяются на несколько классов. Как правило, классы стерильных помещений включают 100-й, 1000-й, 10 000-й, 100 000-й, 1 000 000-й и т. д.
Классы очистки обычно делятся на 100, 1000, 10 000 и 100 000. В настоящее время в производственных помещениях, соответствующих требованиям GMP 2010 года, эта классификация больше не используется; вместо нее применяются классы A, B, C и D, которые соответствуют классам версии 1998 года. Класс очистки оценивается на основе анализа количества частиц пыли, количества воздушно-капельных микроорганизмов и среднего количества осаждающихся микроорганизмов в зоне контроля. К каждому уровню предъявляются разные требования. Уровни очистки подразделяются на статические и динамические.
Основные принципы проектирования и строительства стерильных помещений:
Полы и стены в стерильном помещении должны быть ровными, не допускать скопления грязи и облегчать уборку. Рабочая поверхность стола должна быть расположена горизонтально. В стерильном помещении и буферной комнате устанавливаются ультрафиолетовые лампы; в стерильном помещении ультрафиолетовая лампа располагается на расстоянии 1 метра от рабочей поверхности стола. Персонал, входящий в стерильное помещение, должен быть одет в стерилизованную одежду и головной убор.
В настоящее время стерильные комнаты чаще всего встречаются на микробиологических предприятиях, а в обычных лабораториях используются чистые столы. Основная функция чистых столов заключается в удалении с поверхности рабочего стола различных микроскопических частиц, включая микроорганизмы, с помощью устройства для создания ламинарного воздушного потока. С помощью электрического привода воздух проходит через высокоэффективный фильтр и поступает на рабочую поверхность, благодаря чему она постоянно находится под контролем стерильного воздушного потока. Кроме того, со стороны, обращенной к внешней среде, имеется завеса из воздуха с высокой скоростью потока, предотвращающая попадание загрязненного воздуха извне.
В условиях, когда установка чистой столешницы затруднена, ее можно заменить деревянным стерильным ящиком.
Стерильный ящик имеет простую конструкцию и удобен в перемещении. На передней панели ящика имеются два отверстия, которые закрываются раздвижными дверцами, когда ящик не используется, а во время работы в них можно просунуть руки. В верхней части передней панели установлено стекло, облегчающее работу внутри ящика. Внутри ящика установлена ультрафиолетовая лампа, а через боковые дверцы можно помещать инструменты, микроорганизмы и т. д.
Ⅱ.Правила работы в стерильной комнате
1. В стерильной комнате следует поддерживать чистоту; категорически запрещается складировать посторонние предметы во избежание загрязнения.
2. Необходимо строго предотвращать загрязнение всего стерилизационного оборудования и питательных сред; загрязненные предметы следует выводить из эксплуатации.
3. В стерильной комнате должны иметься дезинфицирующие растворы рабочей концентрации, такие как 5 %-ный раствор фенола, 70 %-ный спирт, 0,1 %-ный раствор хлоргексидина и т. д.
4. Стерильную комнату следует регулярно дезинфицировать и очищать с помощью подходящего дезинфицирующего раствора, чтобы обеспечить соответствие чистоты комнаты установленным требованиям.
5. Все предметы, которые необходимо вносить в стерильную комнату для использования, такие как приборы, инструменты, чашки Петри и т. д., должны быть плотно упакованы и простерилизованы с помощью подходящего метода.
6. Перед использованием стерильной комнаты необходимо включить ультрафиолетовую лампу и провести облучение в течение не менее 30 минут, одновременно включив ламинарный бокс для вентиляции. По окончании работы стерильную комнату следует своевременно убрать, а затем провести стерилизацию ультрафиолетовым излучением в течение 20 минут.
7. Ежемесячно в стерильной комнате следует проверять количество колоний. При включенном ламинарном боксе взять несколько стерильных чашек с внутренним диаметром 90 мм и, соблюдая стерильность, налить в каждую из них примерно 15 мл питательной агаровой среды, растопленной и охлажденной до температуры около 45 °C. после застывания поместить их в инкубатор при температуре 30–35 °C на 48 часов; после подтверждения стерильности взять 3–5 чашек, разместить их в левой, центральной и правой частях рабочей зоны, открыть крышки и выдержать в открытом состоянии в течение 30 минут, затем поместить в инкубатор при температуре 30–35 °C на 48 часов и извлечь для проверки. Среднее количество посторонних микроорганизмов на чашках в зоне чистоты класса 100 не должно превышать 1 колонию, в чистой комнате класса 10000 — 3 колонии. В случае превышения допустимых пределов необходимо провести тщательную дезинфекцию стерильной комнаты до тех пор, пока повторная проверка не покажет соответствие требованиям.
